山西ATP熒光檢測儀系統(tǒng)原理及部件功能解讀
瀏覽次數(shù):1086發(fā)布日期:2019-04-02
山西ATP熒光檢測儀系統(tǒng)原理及部件功能解讀
山西ATP熒光檢測儀系統(tǒng)原理:
螢光能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?熒光素酶(luciferase)、蟲熒光素(D-luciferin)以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)-三磷酸腺苷(ATP)。在有氧的條件下,蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應(yīng),形成氧化熒光素并發(fā)出熒光,其生化反應(yīng)式如下:
ATP+D-Luciferin+O2 Mg++AMP+Oxyluciferin+PPi+CO2+Light Luciferase;
上式表明,只要具備適當(dāng)條件,不僅螢火蟲,即使在試管中也能發(fā)出熒光。當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)中,蟲光素酶和蟲熒光素處于過量的情況下,熒光的強(qiáng)弱取決于ATP的數(shù)量。以檢測含細(xì)菌的樣品為例,細(xì)菌細(xì)胞越多,ATP量越,發(fā)出的熒光也就越強(qiáng)。由于蟲光素酶對ATP的反應(yīng)非常靈敏,熒光強(qiáng)弱可通過熒光儀10-15秒內(nèi)計(jì)量。所以,在排除樣品中非細(xì)菌ATP干擾的情況下,通過熒光值就能確定樣品中細(xì)菌ATP的含量,從而確定細(xì)胞數(shù)量,因此,此系統(tǒng)為半定量快速檢測系統(tǒng)。
山西ATP熒光檢測儀的組成部件及相關(guān)功能:
1.試劑組,按檢測操作順序分:
(1)體細(xì)胞裂解試劑(TRA),能專一而有效地裂解樣品中的非細(xì)菌細(xì)胞(體細(xì)胞)并釋出ATP,然后,通過過濾比色杯底部的濾膜將其排除。
(2)細(xì)菌細(xì)胞裂解試劑(XRA),能專一而有效地裂解樣品中細(xì)菌細(xì)胞并釋出ATP。
(3)熒光反應(yīng)試劑組(LLR),能與樣品中的細(xì)菌ATP相互作用并有效地發(fā)出熒光。
2.微量光度計(jì),準(zhǔn)確計(jì)量檢樣的熒光值。
3.可供100次測定的樣品預(yù)處理耗材:
(1)放置過濾比色杯的杯架一個(gè)。
(2)加壓器一個(gè),用于加壓、排出體細(xì)胞ATP和試劑組。
(3)帶濾膜熒光反應(yīng)比色杯100個(gè),為熒光反應(yīng)容器。
(4)無菌吸水紙,置于過濾比色杯架,吸收加壓后流出的液體。
(5)帶密封圈無菌濃縮器,用于濃縮樣品。
(6)自備微生物學(xué)無菌操作所需常規(guī)用具、器皿,樣品采集無菌、無ATP的容器、塑料袋、手套、鑷子等。